Nieuwe nucleïnezuurdetectiekit voor het coronavirus (SARS-Cov-2).

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Fluertsscent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Pproductiet name 】Nieuwe nucleïnezuurdetectiekit voor het coronavirus (SARS-Cov-2) (fluorescerende RT-PCR-sondemethode)

【Packaging specifications 】25 testen/kit

【Intended usleeftijd】

Deze kit wordt gebruikt voor de kwalitatieve detectie van nucleïnezuur van het nieuwe coronavirus in nasofaryngeale uitstrijkjes, orofaryngeale (keel)uitstrijkjes, voorste neusuitstrijkjes, middenschelpuitstrijkjes, neusspoelingen en neusaspiraten van personen die door hun zorgverlener worden verdacht van COVID19. De detectie van ORF1ab- en N-genen van het nieuwe coronavirus kan worden gebruikt voor aanvullende diagnose en epidemiologische monitoring van nieuwe coronavirusinfectie.

【Principles of the pRocedure 】

Deze kit is ontworpen voor specifieke TaqMan-probes en specifieke primers die zijn ontworpen voor de nieuwe ORF1ab- en N-gensequenties van het coronavirus (SARS-Cov-2). De PCR-reactieoplossing bevat 3 sets specifieke primers en fluorescerende probes voor specifieke detectie van doelen, en een extra set specifieke primers en fluorescerende probes wordt gebruikt als de interne standaardcontrole van de kit voor het detecteren van endogene huishoudgenen.

Het testprincipe is dat de specifieke fluorescerende probe wordt verteerd en afgebroken door de exonuclease-activiteit van het Taq-enzym in de PCR-reactie, zodat de reporter-fluorescerende groep en de uitgedoofde fluorescerende groep worden gescheiden, zodat het fluorescentiemonitoringsysteem een ​​fluorescerend signaal kan ontvangen. signaal, en vervolgens bereikt het fluorescentiesignaal van de probe door het verrijkingseffect van PCR-amplificatie een ingestelde drempelwaarde-Ct-waarde (cyclusdrempel). In het geval dat er geen doelamplicon is, bevindt de reportergroep van de probe zich dicht bij de uitdovende groep. Op dit moment vindt de fluorescentie-resonantie-energieoverdracht plaats en wordt de fluorescentie van de reportergroep gedoofd door de uitdovende groep, zodat het fluorescentiesignaal niet kan worden gedetecteerd door het fluorescerende PCR-instrument.

Om het gebruik van reagentia tijdens de test te controleren, is de kit uitgerust met positieve en negatieve controles: de positieve controle bevat het recombinante plasmide van de doellocatie en de negatieve controle is gedestilleerd water, dat wordt gebruikt om de milieuvervuiling te monitoren. Het wordt aanbevolen om tijdens het testen tegelijkertijd een positieve controle en een negatieve controle in te stellen.

【Main components 】

Opmerking：(1) De componenten in verschillende batchkits kunnen niet worden gemengd of uitgewisseld.

(2) Bereid uw eigen reagens voor: Nucleïnezuurextractiekit.

【Storage conditions En expiration date 】

For BST-SARS-25:Transporteren en lange tijd opslaan bij -20 ± 5 ℃.

For BST-SARS-DR-25:Transporteren bij kamertemperatuur. Lange tijd bewaren bij -20 ± 5 ℃.

Vermijd herhaalde vries-dooicycli. De geldigheidsduur is voorlopig vastgesteld op 12 maanden.

Zie het etiket voor de datum van vervaardiging en gebruik.

Na de eerste opening kan het reagens bij -20 ± 5 ° C worden bewaard gedurende maximaal 1 maand of tot het einde van de reagensperiode, afhankelijk van welke datum zich het eerst voordoet, om herhaalde vries-dooicycli te voorkomen en het aantal reagensbevriezingen te voorkomen. -dooicycli mogen niet langer zijn dan 6 keer.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1. Toepasselijk monstertype: geëxtraheerde nucleïnezuuroplossing.

2. Monsteropslag en transport: Bewaar bij -20 ± 5 ℃ gedurende 6 maanden. Bevries en ontdooi de monsters niet meer dan 6 keer.

【Testing method】

1.Nucleic acid extraction

Selecteer een geschikte nucleïnezuurextractiekit om viraal nucleïnezuur te extraheren en volg de bijbehorende kitinstructies. Het wordt aanbevolen om een ​​nucleïnezuurextractie- en zuiveringskit te gebruiken die is geproduceerd door Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. of een gelijkwaardige nucleïnezuurzuiveringskit.

2.  Relktion reageernt preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Verwijder het SARS-Cov-2-mengsel en het enzymmengsel, smelt volledig bij kamertemperatuur, meng grondig met een Vortex-apparaat en centrifugeer vervolgens kort.

(2) 16,5 µl Enzymmengsel werd toegevoegd aan 358,5 µl SARS-Cov-2 Mix en grondig gemengd om de gemengde reactieoplossing te verkrijgen.

(3) Bereid een schone PCR-octale buis van 0,2 ml voor en markeer deze met 15 µl van de bovenstaande gemengde reactieoplossing per putje.

(4) Voeg 15 μl gezuiverde nucleïnezuuroplossing, de positieve controle en de negatieve controle toe en bedek zorgvuldig de dop van de octale buis.

(5) Meng goed door het ondersteboven te houden en centrifugeer snel om de vloeistof op de bodem van de buis te concentreren.

1